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iTRAQ/TMT标记定量蛋白质组研究

iTRAQ/TMT标记定量蛋白质组研究是对一个基因组表达的全部蛋白质或一个复杂混合体系内所有蛋白质进行标记,利用标记试剂中的二级报告离子来对蛋白进行精确鉴定和定量。
标记试剂分为两种:iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags),是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术,采用多种同位素的标签,可与氨基(包括氨基酸N端及赖氨酸侧链氨基)反应实现连接,通过高精度质谱分析,同时实现多个样本蛋白组的定性和定量。


技术优势

适用范围广:可检测到的蛋白除了胞浆蛋白外,还有线粒体蛋白、膜蛋白和核蛋白。也能对任何类型的蛋白质进行鉴定,包括高分子量,酸性,碱性蛋白质

高通量:一次可以实现多个样品的定性定量分析,特别适用于采用多种处理方式或来自多个处理时间的样本的差异蛋白分析

结果可靠:基于高灵敏度和高分辨的串联质谱方法,定性与定量同步进行,同时得出定性和定量结果,重复样品间的蛋白表达量相关性高

灵敏度高:分级分离,降低样品复杂度,相比凝胶电泳观测到的蛋白变化在2倍以上,iTRAQ计算出的蛋白变化在1.3-1.6倍之间,可检测低丰度蛋白

分离能力强:可分离出酸/碱性蛋白,小于10KDa或大于200KDa的蛋白、难溶性蛋白等

自动化程度高:液质联用,自动化操作,分析速度快,分离效果好


应用方向

病毒领域:新型病毒抑制因子挖掘研究

生物疾病发生发展过程分子机制研究

生物疾病标志物研究

药物作用靶点研究

药物作用机理研究


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