实验背景
蛋白质相互作用/亲和力检测可应用于药物早期研究开发、筛选鉴定、临床前与临床研究以及下游生产质控等各个环节,而且在生命科学基础研究、生物制药开发等领域也有广泛应用。现代药物治疗路线中,利用抗体靶向病变组织或细胞表面受体,已成为理想的治疗方法。这就需要对获得的抗体进行系统地分析鉴定,以确定其在各种免疫学试验中的价值,Fc受体(FcR)是免疫调节受体中非常重要的受体,主要在先天免疫细胞上表达,能识别并结合抗体的Fc端,引发免疫应答。IgG类型抗体的Fc受体是FcγR,依据和Fc片段亲和力的强弱,FcγR又可以被分为三个亚家族:FcγRI(CD64)、FcγRII(CD32)和FcγRIII(CD16);FcγRII可进一步分为FcγRIIa(CD32a)、FcγRIIb(CD32b)和FcγRIIc(CD32c)三个亚类;FcγRIII可以进一步分为FcγRIIIa(CD16a)和 FcγRIIIb(CD16b)两个亚类。其中,与IgG亲和力FcγRI>FcγRIII>FcγRII。
Biacore代表的是SPR(表面等离子共振技术),Fortebio设备代表的是BLI(生物膜干涉技术),均可可以高灵敏度、实时、无标记的检测芯片表面活性蛋白分子的相互作用。此方法可以通过检测活性蛋白间的结合速率、解离速率测算出动力学,也可以测试蛋白分子间的结合强度。近几年越来越多的被用于分析蛋白间的亲和力
适用样本
大分子生物药(诸如单抗、Fc融合蛋白、双抗、多抗、ADC类)为主
主要设备
Fortebio octet系列;
Biacore 8K系列等;
送样要求
需备注清楚样品的消光系数,建议供≥1mg的目标成分,具体送样要求联系对应商务。
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