二硫键位点确证
二硫键是蛋白质多肽链上或多肽链间的两个半胱氨酸(Cys)的硫原子共价结合形成的一种蛋白质翻译后修饰方式，二硫键在维持蛋白质正确折叠、保证蛋白质稳定性以及生物学功能方面具有重要作用。
二硫键鉴定质谱就是利用质谱技术对蛋白质/多肽的二硫键进行鉴定，包括其是否含有二硫键、二硫键的位置以及水平等，通常将质谱法与液相色谱法进行联用，液相色谱用于质谱分析前蛋白肽段酶解物的分离。
检测原理
将蛋白质进行酶切并利用色谱技术对肽段进行分离和收集，再通过串联质谱检测获得肽段的分子量以及肽段的氨基酸序列，最后比较还原性与非还原性蛋白的肽段分子量和氨基酸序列，找出差异片段，以确定二硫键的位置。
应用领域
抗体药物稳定性/活性确认
Lakbub JC, Shipman JT, Desaire H. Recent mass spectrometry-based techniques and considerations for disulfide bond characterization in proteins. Anal Bioanal Chem. 2018 Apr;410(10):2467-2484.
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