技术介绍 | 中心碳代谢高通量靶标定量
发布时间 2022-08-23
中心碳代谢(CCM)传统意义上包括糖酵解途径(EMP)、磷酸戊糖途径(PPP)以及三羧酸循环途径(TCA)。中心碳代谢是生物体所需能量的主要来源,并为体内其他代谢提供前体物质,且CCM中关键酶的酶活及蛋白表达水平具有遗传分辨性,类似于表型,可用于大致的种属分辨。鉴于CCM在所有生命体中的重要作用,研究其代谢物的表达具有非常重要的意义。离子色谱-质谱(HPIC-QTRAP/MS)可以高通量检测样本中心碳代谢通路中各物质的含量,通过数据分析以确定物质间的变化关系。

技术介绍 | 中心碳代谢高通量靶标定量(图1)

中心碳代谢检测列表

注:共可检测56种中心碳代谢物质


技术优势

▶ 定性定量准,构建物质标准曲线,提供物质的绝对含量

▶ 技术成熟稳定、分辨率高、选择性好

 样本前处理经验丰富

 专业的数据分析团队


技术路线

技术介绍 | 中心碳代谢高通量靶标定量(图2)



技术参数

▶ 样本要求

植物组织:1g/sample

动物及临床组织标本:200mg/sample

血清、血浆:200μL/sample

尿液:200μL/sample

细胞、微生物:1X 107cells/sample

▶ 生物学重复

样本数量:植物和微生物n≥6,动物样本n≥10,临床样本n≥30,所有重复样本独立分析,其他种类的样品在收集之前请联系公司销售工程师。



应用方向

▶ 动植物生理功能研究

▶ 临床疾病病理机制的研究,早期诊断

 微生物生长功能研究

案例分析

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丙酮酸激酶亚型M2通过β-Catenin信号通路促进小胶质细胞突触修剪损害系统性红斑狼疮患者的认知功能

研究对象:小鼠
期刊:Journal of Neuroinflammation
影响因子:9.587
时间:2021年 


研究背景


系统性红斑狼疮(SLE)是一种累及全身多个器官的自身免疫性疾病。临床上,12-95%的SLE患者出现精神和神经系统症状,也称为神经精神性系统性红斑狼疮(NPSLE),严重影响生活质量,增加疾病相关死亡率。在美国风湿病学会(ACR)定义的19种NPSLE综合征中,认知功能障碍被认为是SLE最痛苦的症状之一。它的发展是独立且隐蔽的,通常对标准的免疫抑制没有反应。越来越多的证据表明,复杂和相互关联的机制促进了SLE认知障碍的发展,但具体的作用机制仍不清楚。 



研究结果


本研究探究了小胶质细胞在NPSLE小鼠认知功能障碍中的作用,分析和比较了神经精神性系统性红斑狼疮模型小鼠和对照组小鼠海马区组织中的代谢物。根据这些变化,发现了丙酮酸激酶亚型 M2(PKM2)可能是诱发NPSLE的关键分子,进而探讨了系统性红斑狼疮(SLE)介导的认知和脑损伤的发病机制。



研究思路


技术介绍 | 中心碳代谢高通量靶标定量(图4)




结果展示


与对照组相比,MRL/lpr狼疮小鼠海马糖酵解增加(图1),葡萄糖消耗和乳酸生成增加,海马区小胶质细胞PKM2激活(图2)。PKM2通过β-catenin信号通路促进小胶质细胞激活和过度激活小胶质细胞吞噬(图3)。抑制小胶质细胞PKM2可以减轻MRL/lpr小鼠的认知障碍和脑损伤,并通过阻断β-catenin信号通路来减少小胶质细胞的激活和神经元突触的丢失(图4)。

技术介绍 | 中心碳代谢高通量靶标定量(图5)

图1. 中心碳代谢组分析显示MRL/LPR小鼠海马糖酵解代谢产物增加

技术介绍 | 中心碳代谢高通量靶标定量(图6)

图2. 糖酵解酶PKM2在NPSLE小鼠体内表达上调

技术介绍 | 中心碳代谢高通量靶标定量(图7)

图3. NPSLE激活小胶质细胞,诱导神经元吞噬

技术介绍 | 中心碳代谢高通量靶标定量(图8)

图4. 抑制小胶质细胞PKM2可减轻MRL/LPR小鼠的脑损伤和认知障碍

参考文献:

Li Lu, Hailin Wang, Xuan Liu et al. Pyruvate kinase isoform M2 impairs cognition in systemic lupus erythematosus by promoting microglial synaptic pruning via the β-catenin signaling pathway. J Neuroinflammation, 18, 229, 2021. https://doi.org/10.1186/s12974-021-02279-9.

文献下载链接:

https://pan.baidu.com/s/1gl1nD6ou_if0aFRGHkRWiQ

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